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TGFα 免疫组化检测试剂盒 H,M,R,Rb

TGFα 免疫组化检测试剂盒 H,M,R,Rb

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公司厂家直销TGFα 免疫组化检测试剂盒 H,M,R,Rb,权威出售各系列检测试剂盒、各种属类elisa试剂盒、酶联免疫试剂盒种类齐全,欢迎大家选购!
库存:现货
运输:快递
用途:科研
规格:96T/48T(盒装)
TGFα 免疫组化检测试剂盒 H,M,R,Rb更多优质产品信息:
荧光素超氧化物歧化酶2抗体IgG 鸡白介素18(IL-18)ELISA
超氧化物歧化酶3抗体IgG 鸡白介素1(IL-1)ELISA
超氧化物歧化酶4抗体IgG 鸡病毒性肠炎病毒(DEV)ELISA
溶质携带物家族-1抗体IgG 鸡肌红蛋白(MYO/MB) ELISA
生长抑素抗体IgG 鸡白介素9(IL-9)ELISA
干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因抗体IgG 鸡白介素3(IL-3)ELISA
胚胎干细胞关键蛋白抗体IgG 鸡白血病抑制因子(LIF)ELISA
生物素标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgG 鸡转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA
P物质抗体IgG 鸡C反应蛋白(CRP)ELISA
肺表面活性蛋白A抗体IgG 鸡血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA
抗信号感应增殖相关蛋白 1抗体IgG 鸡免疫球蛋白G(IgG)ELISA
抗精子相关抗原5抗体IgG 鸡碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA
富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗体IgG 鸡可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA
肺表面活性蛋白B抗体IgG 鸡可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA
肺表面活性蛋白D抗体IgG 鸡表皮生长因子(EGF)ELISA
血影蛋白/收缩蛋白抗体IgG 鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA
鞘氨醇激酶1抗体IgG 鸡生长激素(GH)ELISA
鞘氨醇激酶2抗体IgG 鸡乙酰乙酸检测(ACAC)ELISA
Spindlin 1/SPIN-2 肿瘤形成相关基因抗体IgG 鸡传染性鼻炎抗体(IC)ELISA
抗spindly抗体IgG 鸡透明质酸(HA)ELISA
整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-7抗体IgG 鸡硫酸类肝素(HS)ELISA
磷酸化Src原癌基因抗体IgG 鸡催乳素(PRL)ELISA
胆固醇调节元件结合蛋白1抗体IgG 鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA
胆固醇调节元件结合蛋白2抗体IgG 鸡促卵泡素(FSH)ELISA
胆固醇酯转移蛋白抗体IgG 鸡促黄体激素(LH)ELISA
血清应答因子抗体IgG 鸡γ干扰素(IFN-γ)ELISA
类固醇受体辅助活化因子-3抗体IgG 鸡白介素6(IL-6)ELISA
磷酸化类固醇受体辅助活化因子-3抗体IgG 鸡碳酸酐酶(CA)ELISA
磷酸化生长激素释放因子抗体(血清应答因子) IgG 鸡抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA
突触结合蛋白相关基因2抗体IgG 鸡热休克蛋白20(HSP-20)ELISA
突触结合蛋白5抗体IgG 鸡热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA
突触结合蛋白4抗体IgG 鸡17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA
睾丸精子发生相关基因5抗体IgG 鸡白介素4(IL-4)ELISA
Western Blot操作方法:
1.制胶及上样:
(1)配制12%SDS-PAGE分离胶,混匀后注入边条厚度为2mm的两块洁净玻璃板间,其上加
一薄层异丙醇,室温下静置至凝固。
(2)待分离胶完全聚合后,倾去其上的水层,以吸水纸吸净残余液体,插入加样梳,缓缓加入浓缩胶,使其充满加样梳间的空隙,室温下静置。待胶完全聚合。
(3)将凝胶固定于电泳装置上,上、下槽加入电泳缓冲液。
(4)小心拔去加样梳,使加样孔竖直,以电泳缓冲液冲洗加样孔数次。
(5)分别取50µg蛋白量的细胞总蛋白样品及蛋白质分子量Marker,按4:1体积比加入5´样品缓冲液,以1´样品缓冲液?配平上样体积(总体积20µ1)后,于沸水浴中煮3min使蛋白变性。
(6)将处理好的样品按照预定的顺序加入分离胶的上样孔中。
2.电泳
(1)接通凝胶电泳仪的电源,初始电压70V。(约30分钟)
(2)溴酚蓝染料的前缘进入分离胶上缘后提高电压至160V,继续电泳直至溴酚蓝泳出分离胶的下缘。(约60分钟)
3.转膜
(1)从玻璃板中取出凝胶,将其浸泡于转移缓冲液中。
(2)取与胶同样大小的硝酸纤维素膜,以95%乙醇浸泡5秒钟后浸泡于转移缓冲液5分钟以上待用。
(3)按顺序在转移夹内放置预先经转移缓冲液浸泡的海绵、三层滤纸、硝酸纤维素膜、凝胶、三层滤纸、海绵,保证每层之间没有气泡。
(4)将转移夹放入转移槽,膜在正极、胶在负极,接冷却循环水,90V稳压转移2小时。
4.染色
(1)将硝酸纤维素浸入丽春红使用液中,振摇染色5-10min。
(2)蛋白质条带出现后,用去离子水洗去硝酸纤维膜上的丽春红底色。
(3)按照蛋白质分子量Marker指示的位置剪下目的条带所在的硝酸纤维素膜。
5.封闭
把硝酸纤维素膜浸入5%脱脂奶粉,室温摇动2小时。
6.洗膜与杂交
(1)以T-TBS洗膜,10分钟´ 3次。
(2)第一抗体封闭: SPARC单抗以T-TBS 1:200稀释,按0.1ml/cm2加入封有硝酸纤维素膜的杂交袋中,去除所有气泡,4℃振摇过夜。
(3)以T-TBS洗膜,10分钟´ 3次。
(4)第二抗体封闭:辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG抗体(1:4000),按0.1 ml/cm2加入封有硝酸纤维素膜的杂交袋中,去除所有气泡,室温下振摇60分钟。
(5)以T-TBS洗膜,10分钟´ 3次。
7.化学发光与曝光
(1)将化学发光试剂盒中的两种试剂各取0.5ml,按1:1的比例混合,在暗室中与硝酸纤维素膜摇动孵育1分钟。
(2)用滤纸沾干膜上的液体,用保鲜膜包好,用感光胶片在压片盒中曝光约1分钟。
(3)曝光后的感光胶片在显影液中显影约30秒钟,定影液中定影1分钟,用水冲洗后晾干。
(4)根据曝光情况调整曝光时间,重复压片、显影及定影,选择满意的胶片。
(5)重复实验三次。
注意事项:
western blot中转移在膜上的蛋白处于变性状态,空间结构改变,因此那些识别空间表位的抗体不能用于western blot检测。这种情况可以将表达目的蛋白的细胞或细胞裂解液中的所有蛋白先生物素化,再用酶标记亲和素进行western blot。实验中取胶和膜需带手套。