上海古朵生物科技有限公司

ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒说明书

ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒说明书

参考价格:¥50.00
品  牌:古朵
产品型号:48t/96t
适用范围:高教
所在地区:上海 嘉定区
上架时间:2017-09-06
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详细说明

  上海古朵生物科技有限公司专业经营ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒说明书,培养基,抗体,细胞株,化学试剂,标准品对照品,实验耗材,动物血清,其他生化试剂,提供相关EILSA试剂盒的价格,规格,优点,特性等资讯,为客户提供免费代测ELISA试刘盒服务,ELISA种属成千上万,欢迎来电咨询!

  中文名:人ELISA试剂盒

  别名:人ELISA Kit

  英文名:Human ELISA Kit

  供应商:上海古朵

  规格:48t/96t

  保存:2-8℃

  有效期:6个月

  范围:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断。

  特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。

  用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

  检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

  样本类型:适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等样本。

  ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。

  引起ELISA测定错误结果的原因主要有:

  ①标本因素;

  ②试剂因素;

  ③操作因素。

  

ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒说明书

  ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒液体类标本:

  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

  1)血清:

  室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  2)血浆:

  应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  3)尿液:

  用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

  4)细胞培养上清:

  检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  5)组织标本:

  切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

  人ELISA检测试剂盒严格注明:

  1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

  2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

  3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

  4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

  5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。

  ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒说明书操作步骤:

  1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

  2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

  3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

  4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

  5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

  6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

  7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

  8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

  9.在450nm波长处测定各孔的OD值。

  建议使用的实验方案:

  6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

  ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒说明书性能:

  1.灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

  2.特异性:不与其它细胞因子反应。

  3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

  结果判断与分析:

  1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值。

  2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的ICAM-1/CD54标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的ICAM-1/CD54含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

  3、检测值范围:0-80ng/ml

  4、敏感度:0.1ng/ml