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人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit

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产品型号:48T/96T
所在地区:华东 上海
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人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit
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,保证产品质量。凡够买我公司ELISA检测试剂盒可免费

提供代测服务。
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    ELISA酶联免疫试剂盒特异性好,灵敏度高。
    它的方法类型和操作步骤如下:ELISA可用于测定抗

原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的

试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③

酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的

具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
    (一)双抗体夹心法
     双抗体夹心法:是检测抗原最常用的方法,操作步

骤如下:
    (1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体

:洗涤除去未结合的抗体及杂质。
    (2)加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时

间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相

抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
    (3)加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶

标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体

上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
    (4)加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有

色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
    根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶

标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。
    (二)双位点一步法
    在双抗体夹心法测定抗原时,如应用针对抗原分子上

两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶

标抗体,则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两

步并作一步。这种双位点一步不但简化了操作,缩短了反

应时间,如应用高亲和力的单克隆抗体,测定的敏感性和

特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的

ELISA提高到新水平。
    在一步法测定中,应注意钩状效应(hookeffect),

类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗

原浓度相当高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结

合,而不再形成夹心复合物,所得结果将低于实际含量。

钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。
   (三)间接法测抗体
    间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标

记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接

法。操作步骤如下:
    (1)将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原

:洗涤除去未结合的抗原及杂质。
    (2)加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结

合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只

留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不

能与固相抗原结合,在洗涤过程中被洗去。
    (3)加酶标抗抗体:与固相复合物中的抗体结合,

从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶

量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体

,可用酶标羊抗人IgG抗体。
     每个试剂盒操作是不同的,请按说明书操作。具体

事项请来电咨询!