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 β-EP,原装小鼠β-内啡肽elisa试剂盒哪家好
  • β-EP,原装小鼠β-内啡肽elisa试剂盒哪家好
  • β-EP,原装小鼠β-内啡肽elisa试剂盒哪家好

    参考价格: ¥0.00
    品  牌:BIM
    产品型号:β-EP
    适用范围:高教
    所在地区:美国
    上架时间:2017年10月18日
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    详细说明

    l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠β-内啡肽β-EP)的含量。

    l有效期:6个月

    l保存条件:2-8℃

    l本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

    二、“β-EP,原装小鼠β-内啡肽elisa试剂盒哪家好”的四大特性

    1.特异性强:不与其它细胞因子反应。

    2.重复性好:板内、板间变异系数均小于10%。

    3.稳定性高:实验效果很稳定。

    4.超灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品,稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

    三、“β-EP,原装小鼠β-内啡肽elisa试剂盒哪家好”具体操作方法

    以双抗体夹心法为例展示:

    1、双抗体夹心法检测抗原

    操作步骤如下:

    1)将特异性抗体与固相载体结合,形成固相抗体。洗涤除去尚未结

    合的抗体及一些杂质。

    2)加入待测标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。

    3)加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。

    4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要获得针对受检抗原的特异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标所使用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。

    在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同,如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被为钩状效应(hook effect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质(例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等)时,应注意可测范围的最高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。

    四、客户收集样品要求

    ·客户需提供待检测抗体和包被用抗原。

    ·检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆。

    ·样本收集后应立即-20℃保存,若长期保存应-70℃。

    ·样本量的要求:若一个指标做复孔检测应不少于250ul,做单孔检测应不少于120ul。建议若客户样本量充足最好提供500ul以上。

    ·客户的样本收集后,立即按要求保存,切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输。邮寄前请与技术支持沟通确认。

    五、Elisa试剂盒组成

    1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶

    2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(480ng/L) 0.5ml×1 瓶

    3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶

    4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份

    5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张

    6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个

    六、Elisa试剂盒标本要求

    1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能

    马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

    2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    七、操作步骤

    1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

    240ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液

    120ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液

    60ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液

    30ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液

    15ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液

    2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

    4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7. 温育:操作同3。

    8. 洗涤:操作同5。

    9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.

    10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

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