人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒操作步骤_中国教育装备采购网

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 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒操作步骤
  • 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒操作步骤
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  • 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒操作步骤

    参考价格: ¥50.00
    品  牌:古朵
    产品型号:48t/96t
    适用范围:全领域
    所在地区:上海 嘉定区
    上架时间:2017年09月06日
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    详细说明

      上海古朵生物科技详细为您介绍人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒操作步骤,性点,用途,价格,规格,操作说明书,注意事项等详情,本司专业经营进口/国产ELISA试剂盒,动物血清,培养基,抗体,化学试剂,生化试剂,标准品,染色液,为客户提供免费代测ELISA试剂盒服务,所销售的ELISA试剂盒种属涵盖了大鼠,小鼠,人,豚鼠,植物,马,鸭,鸡,兔,猪,狗及其他动物,欢迎来电咨询更多ELISA试剂盒种属!

      中文名:人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒

      别名:人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISAKit

      供应商:上海古朵

      规格:48t/96t

      保存:2-8℃

      有效期:6个月

      产品特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。

      产品实验设备:酶标仪, 37℃恒温箱,自动洗板机,可调节移液器以及其吸头,蒸馏水,干净的试管,容量瓶等。

      产品应用领域:本ELISA试剂盒限科研,严禁临床使用。

      特点:灵敏性高、特异性强、重复性好。

      检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

      

    人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒操作步骤

      人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒组织结构:

      1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心23分钟将血红细胞迅速小心地分离。

      2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。

      3、 细胞上清液:1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。

      4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟,取上清液。

      5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

      αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒细胞裂解液裂解细胞之前,必须根据以下方向的测定。

      1.贴壁细胞应分离胰蛋白酶和离心后收集(悬浮细胞将离心收集直接)。

      2.洗细胞三次冷PBS。

      3.悬浮细胞在PBS(1×)和细胞受超声处理4次(或≤冷冻细胞-20°C。用温和的混融细胞。3次重复冻结/解冻周期。)

      4.在1500×g离心10分钟在2到8摄氏度去除细胞碎片。

      5.细胞培养上清和其他生物液体在1000×g离心20分钟去除样品颗粒和即刻检测或者商店样品在-20°C或稀释后使用80oC。避免重复冻结/解冻循环。

      人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒操作步骤液体类标本:

      包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

      1)血清:

      室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

      2)血浆:

      应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

      3)尿液:

      用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

      4)细胞培养上清:

      检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

      5)组织标本:

      切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

      

    人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒操作步骤

      人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒说明书问题解析:

      1.试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。

      2.加样中可能遇到的问题:在做血清或是血浆用于检测试剂的时候,会碰到血清血浆不好分离的情况,这个时候的解决办法最好是先放在常温中1到2小时,然后在进行离心处理

      3.洗板时容易造成误差: 因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以最好多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动

      人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒操作步骤

      1. 每孔分别加入已稀释的样品、标准品各100ul。

      2. 将板置于37℃温育30分钟。

      3. 甩尽板中液体,用应用洗涤液进行洗涤,每次停留30秒,在纸上拍干。重复操作5次。

      4. 每孔加入酶标偶合液100ul。

      5. 将板置于37℃温育30分钟。

      6. 甩尽板中液体,用应用洗涤液进行洗涤,每次停留30秒,在纸上拍干。重复操作5次。

      7. 每孔加底物A、底物B各50ul,置37℃恒温箱反应15分钟。

      8.每孔加终止液50ul,于450nm波长读O.D.值。

      人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒注意事项,:

      1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

      2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

      3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

      4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

      5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

      6.底物请避光保存。

      7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

      8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

      9.本试剂不同批号组分不得混用。

      10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。