赛百慷细胞库,生物实验

4008190228-0568
 人脐静脉内皮细胞
  • 人脐静脉内皮细胞
  • 人脐静脉内皮细胞

    参考价格: ¥0.00
    品  牌:icell
    产品型号:HUVEC
    适用范围:高教
    所在地区:上海 徐汇区
    上架时间:2018年06月26日
    留言咨询
    4008190228-0568   QQ交谈
    与企业取得联系时请告知该信息获取自中国教育装备采购网
    我要分享
    联系我们
    
  • 赛百慷细胞库,生物实验
  • 第1年

  • 联系人:许飞
  • 手机号:18516249105
  • 微信号:IWJW18516249105
  • 地址:中国(上海)自由贸易试验区希雅路11号14号楼四楼
  • 4008190228-0568
  • [在线留言]   QQ交谈
  • 热门产品
    产品分类
    详细说明

      

    人脐静脉内皮细胞

    细胞介绍

    该细胞来源于人静脉内皮,可在半固体培养基中形成克隆,在免疫抑制小鼠中不能形成肿瘤。

    细胞特性

    1)来源:人静脉内皮

    2)形态:内皮细胞

    3)含量:>1x106

    4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

    5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

    运输和保存

    可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

    (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

    (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

    (3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

    细胞用途:仅供科研使用。

    细胞接收后的处理:

    1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

    2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

    3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml完全培养基。

    4)如果细胞长满80%-90%请及时进行细胞传代。

    5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

    细胞培养步骤

    一.培养基及培养冻存条件准备:

    1)准备ECM培养基;优质胎牛血清,5%;添加对应因子;双抗,1%。

    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

    二.细胞处理:

    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜。第二天检查细胞密度。

    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

    1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

    3.按6ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

    4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含6ml培养基瓶中。

    注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

    下面T25瓶为例;

    1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

    2.1000rpm离心分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

    3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。