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磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒
  • 磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒
  • 磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒

    产品报价: 面议
    品  牌:惠彤TM
    产品型号:HRXJ-030
    所在地区:河南
    (联系我时,请说明是在教育装备采购网上看到的,谢谢!)
    详细说明

    磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒使用说明书

    概述
     

    本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,从样品中分离纯化高质量基因组DNA,特殊包被的磁珠,在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个过程不涉及有毒试剂,安全、便捷、提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组DNA (OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7~2.0之间,可以应用到各类下游分子生物学实验。

    Production.no

    名称

    规格

    储存条件

    保质期

    HRXJ-030

    磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒

    100T

    4℃

    180天

    适用范围

    适用于从各种革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌等中提取基因组DNA,适用于自动化核酸提取平台。

    试剂盒包装及组成

    试剂盒组成

    数量

    Buffer A

    20 ml×1瓶

    Buffer B

    1 ml×1瓶

    Buffer C

    1 ml×1瓶

    磁珠结合液

    25 ml×1瓶

    洗涤液Ⅰ

    50 ml×1瓶

    洗涤液Ⅱ

    30 ml×1瓶,使用前加入80 ml无水乙醇,混匀

    洗脱液

    10 ml×1瓶

    使用说明书

    1份

    注意事项

     

    1. Buffer A在使用前在温浴设备中温育至白色沉淀完全溶解后使用。

    2.如果下游实验对RNA污染比较敏感,可在裂解中第⑶步加1µl RNaseA(10mg/ml)。

    3. Buffer B 4℃保存,可能会析出白色粉末状沉淀,使用前混合均匀,不影响使用效果。

    4.磁珠结合液用前一定要充分混匀。

    5.溶菌酶用缓冲液稀释,缓冲液为(20mMTris,pH8.0;2mMNa2-EDTA;1.2%TritonX-100 )。

    6.如果同等取样量下欲得到更多DNA可以增加洗脱次数(洗脱次数最好不要超过3次)。

    操作方法

     

    1.裂解

    ⑴ 取1ml过夜培养的菌液至1.5ml EP管中,12000 rpm离心1min,尽量吸净上清。

    ⑵ 如果样品为革兰氏阳性菌(葡萄球菌除外,葡萄球菌可直接按照阴性菌步骤操作,加入适量溶葡萄球菌酶裂解效果更好)可加入25µl 20mg/ml的溶菌酶(客户自备)反复吹打使菌体充分悬浮,37℃消化30~60min(注:消化时间取决于所用的菌种),如果样品为革兰氏阴性菌可直接进行步骤⑶。

    ⑶ 加入200µl Buffer A、10 µl Buffer B、10 µl Buffer C,反复吹打使菌体充分悬浮(可用漩涡振荡器,1200~1800rpm)。然后把EP管置于恒温水箱中70℃温育至白色沉淀物完全溶解(所用时间一般为10~30min)。

    2.结合

    将EP管从温育设备中取出,加入振荡混匀的磁珠结合液250µl,颠倒混匀5min。将EP管置于磁力架上进行磁分离,吸弃废液,(吸净管盖及管底残液)。

    3.洗涤

    ⑴ 加入500µl洗涤液Ⅰ,点振5~10次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;

    ⑵ 加入500µl洗涤液Ⅱ,点振5~10次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;

    ⑶ 重复步骤⑵一次,室温下开盖干燥5min。

    4.洗脱

    加入50~100µl洗脱液,缓慢抽吸混匀,65℃温浴10min。每隔2~3min轻摇EP管几下混匀。然后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下游实验。

    常见问题及参考意见请联系下方信息
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