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AIF,进口大鼠凋亡诱导因子ELISA试剂盒说明书
  • AIF,进口大鼠凋亡诱导因子ELISA试剂盒说明书
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    产品报价: 5200
    品  牌:BIM
    产品型号:AIF
    适用范围:高教 职教
    所在地区:美国
    (联系我时,请说明是在教育装备采购网上看到的,谢谢!)
    详细说明

    l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠凋亡诱导因子(AIF)的含量。

    l 有效期:6个月

    l 保存条件:2-8℃

    l 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

    实验原理

    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠凋亡诱导因子(AIF)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠凋亡诱导因子(AIF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

    AIF,进口大鼠凋亡诱导因子ELISA试剂盒说明书操作方法

    竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合,因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量成反比。操作步骤如下:

      (1)将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。

      (2)待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原,保温后,酶标抗原与固相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。

      (3)加底物显色:参考管中由于结合的酶标抗原最多,故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差,代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡,表示标本中抗原含量越多。

    Elisa间接法、竞争法、捕获法,应用亲和素和生物素的ELISA

    亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉亲和素。生物素又称维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟 基琥珀亚胺酯(BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的结合,虽不属免疫反应,但特异性强,亲和力大,两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置,可以连接更多的生物素化的分子,形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物素与ELISA偶联起来,就可大大提高ELISA的敏感度。

    AIF,进口大鼠凋亡诱导因子ELISA试剂盒说明书

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