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CK,大鼠肌酸激酶ELISA试剂盒说明书
  • CK,大鼠肌酸激酶ELISA试剂盒说明书
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    产品报价: 5200
    品  牌:BIM
    产品型号:CK
    适用范围:高教 职教
    所在地区:美国
    (联系我时,请说明是在教育装备采购网上看到的,谢谢!)
    详细说明

    l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠肌酸激酶(CK)的含量。

    l 有效期:6个月

    l 保存条件:2-8℃

    l 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

    实验原理

    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠肌酸激酶(CK)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠肌酸激酶(CK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

    CK,大鼠肌酸激酶ELISA试剂盒说明书性能:

    1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
    2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
    3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

    ELISA试剂盒结果判断与分析
    1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
    2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的待测物质标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

    ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
    1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
    3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
    4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
    5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    CK,大鼠肌酸激酶ELISA试剂盒说明书操作步骤
    1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
    2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
    3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
    4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
    6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
    8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
    9)在450nm波长处测定各孔的OD值。

    试剂的准备
    1)标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。
    2)洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

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    CK,大鼠肌酸激酶ELISA试剂盒说明书

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