紫外分光光度法测定茶叶中咖啡碱原理
咖啡碱结构上的嘌呤环具有共轭双键体系，因而具有独特的吸收光谱，在波长272~274nm处有最大吸收值，其消光度与咖啡碱含量呈线性关系，所以可通过消光度求其含量。
试剂及主要仪器
1、电子分析天平
2、752分光光度计
3、恒温水浴锅
4、吸滤装置
5、移液管
6、锥形瓶
7、碱性乙酸铅溶液：称取50g碱性乙酸铅，加水100ml，静置过夜;上海创赛提供碱式乙酸铅(AR)，1335-32-6，商品编号：C84-100792-500g，价格184.3元。
8、0.01N HCL溶液：取比重1019的浓HCL 0.83ml，稀释至1升。
9、咖啡碱标液：准确称取100mg咖啡碱(纯度不低于99%)溶于100ml水中，作为母液。准确吸取5.00ml加水至100ml作为工作液。(每毫升含0.05mg)
操作方法
1、准确称取均匀磨碎的茶样3.0000g于500ml锥形瓶中，加沸水蒸馏450ml，立刻移入沸水浴中，浸提完毕立即趁热减压过滤。滤液移入500ml容量瓶中，残渣用少量热蒸馏水洗涤2~3次，并将滤液倒入上述容量瓶中，用水稀释至刻度。
2、用移液管准确吸取试液10.00ml，移入100ml容量瓶中，加入5ml 0.01N的盐酸和1ml碱性乙酸铅溶液，用水稀释至刻度，充分混匀，静置过滤。准确吸收25.00ml滤液注入50ml容量瓶中，加入3滴6N硫酸溶液，加水稀释至刻度、混匀、静置过滤。用10mm比色杯，在波长274nm处，以试剂空白为溶液参比，测定其吸光度。上海创赛提供752紫外可见分光光度计，商品编号：E52-UV752，询价。
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