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粗多糖含量测定中标准品的选择

教育装备采购网 2016-07-13 09:02 围观755次

  多糖是存在于自然界的醛糖和(或)酮糖通过糖苷键连接在一起的聚合物(一般10个以上)。多糖是一切有生命的有机体必不可少的成分,它与维持生命的种种生理机能有着密切的联系。用于粗多糖含量测定的方法有很多,一类是利用了多糖的还原性,测定还原性多糖的方法有3, 5-二硝基水杨酸盐(DNS)比色法和Somogyi-Nelson法。另一类测定方法,也是现在普遍使用的方法,是利用多糖在强酸性条件下脱水生成糠醛或其衍生物,然后再与酚类或胺类化合物缩合,生成有特殊颜色的物质的这一性质进行测定,这类方法有地衣酚-硫酸法、苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法。

  苯酚-硫酸法是用得较多的方法,苯酚-硫酸试剂可与游离的寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应,己糖在490 nm处有最大吸收值,吸收值与糖含量呈线性关系。此法是先用标准糖制作标准曲线后,再通过多糖的显色反应测定吸光度,然后根据其在曲线上的位置推算出多糖的浓度从而推算其含量。此法操作简单、快速、灵敏、重复性好,对每种糖仅需制作一条标准曲线。蒽酮-硫酸法是另一种常用的方法,其原理是利用糖类遇浓硫酸脱水后生成糖醛或其衍生物,可与蒽酮试剂缩合,反应后溶液呈蓝绿色,于620 nm处有最大吸收,显色深度与多糖的含量呈线性关系。

  品名:葡聚糖 Dextran

  CAS NO: 9004-54-0

  分子式:C6nH10nO5n

品牌

产品名称型号

货 号

包装规格

市场价

折扣价

Pefermiker

葡聚糖5, Dextran,分子量5000

C16-D104010-25g

25g

348.00

278.00

Pefermiker

葡聚糖5, Dextran,分子量5000

C16-D104010-100g

100g

1596.00

1276.00

Pefermiker

葡聚糖5, Dextran,分子量5000

C16-D104010-500g

500g

3987.00

3189.00

Pefermiker

葡聚糖40,Dextran,分子量40000

C16-D104008-25g

25g

142.40

114.00

Pefermiker

葡聚糖40,Dextran,分子量40000

C16-D104008-100g

100g

309.00

247.00

Pefermiker

葡聚糖40,Dextran,分子量40000

C16-D104008-500g

500g

1268.00

1014.00

  目前,在制作标准曲线的标准品的选用上普遍存在争议。葡萄糖因为其低廉的价格和方便的来源,一直是研究人员的首选。但当我们深究比色法的原理,发现其本身不能区分单糖和寡糖,所以它的测定结果很大程度上依赖于标准品的选择。此外,比色法通常用浓硫酸短时间水解粗多糖,对于分子量较小的粗多糖,高浓度的硫酸可以在较短时间内将其水解成寡糖和单糖,但当粗多糖的分子量较大时,水解是很难控制的。比如对香菇粗多糖(分子量500,000~1,000,000)的完全水解就需要4M HCl或2M H2SO4于100℃作用3-6小时。因此如果用葡萄糖做标准曲线,势必对粗多糖样品中大分子部分的测量带来很大的误差。所以,国内外的学者的研究数据表明:1)对于比色法测定当标准品与被测样品的结构类似时,得到的结果要准确得多[1];2)用葡萄糖做标准品和用葡聚糖做标准品测粗多糖含量时,前者测的结果不同程度的偏高[2, 3]。这样看来,用葡萄糖作为测定多糖含量的标准品是不合适的。

  燕麦β-葡聚糖是一种β-(1→3)-(1→4)键接的线性葡聚糖,在结构、粘度等其他物理性质上与常见的植物和真菌多糖很相似,适合作为植物、真菌来源多糖含量测定的标准品。但由于多糖纯化困难,市面上不少葡聚糖纯度较低,不适合作为标准品。

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点击进入上海创赛科技有限公司展台查看更多 来源:教育装备采购网 作者:上海创赛科技有限公司 责任编辑:黄磊 我要投稿
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