1. 取12.5-13.5dpc孕鼠，断颈处死;
2. 将鼠腹面向上放置，70% 酒精润湿、消毒腹部(防止腹毛飞扬，污染内脏及子宫)，剪开皮肤层、肌肉层，打开腹腔，将连接在子宫上的结缔组织及脂肪剪去，将子宫取出，转入无菌10cm平皿中;
3. 把平皿转入超净台;
4. 用镊子打开子宫壁，挤出鼠胚，并与胚外组织、胎盘等分离，除去鼠胚的头、四肢及各种内脏(主要为肝脏、肺脏、心脏和肠胃等);
5. 将鼠胚移入另一新的无菌皿，用PBS洗三次;
6. 弃去PBS，用弯头剪将鼠胚剪碎，加入PBS洗至溶液基本无色(1-4次);
7. 加入适量Trypsin-EDTA(0.25% )，体积约等于组织块体积;上海创赛科技提供610769-35-2,Tris Borate EDTA buffer, for molecular biology, 10x, DNAse, RNAse and Protease free, pH 8.3 ,商品编号：C82-32733-1LT，价格763元。
8. 用滴管轻轻吹匀，室温下消化1-10分钟(或消化至溶液浑浊变粘)，加入与消化液等体积培养基，轻轻吹打混匀(5-10次)，静置;
9. 沉降后将上部溶液轻轻吸出，转入离心管中。
10. 将细胞悬液管离心(1000转5分钟);
11. 弃去上清，向沉淀中加入适量培养基，轻轻吹打重悬，将其分种至10 cm细胞培养皿，补加适量培养基，作标签(ME-0;注意：若冻存，则可以使用复苏后的0代ME制作Feeder;若直接使用则最好不用0代ME细胞做Feeder，要传到一代以后再用来制作Feeder比较好)，转入培养箱培养;
12. 视细胞生长情况换液(一般3天换液一次)，若细胞已长满，则冻存，或者1：3-5传代(视细胞疏密而定)，放入培养箱继续培养(此后不用再换液);1-5代的ME细胞均可用来制作Feeder。
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