亲和层析法是近年来广为重视并得到迅速发展的提纯、分离方法之一。许多物质都具有和某化合物发生特异性可逆结合的特性。例如:酶与辅酶或酶与底物(产物或竞争性抑制剂等),抗原与抗体,凝集素与受体,维生素与结合蛋白,凝集素与多糖(或糖蛋白、细胞表面受体),核酸与互补链(或组蛋白、核酸多聚酶、结合蛋白)以及细胞与细胞表面特异蛋白(或凝集素)等。亲和层析法就是利用化学方法将可与待分离物质可逆性特异结合的化合物(称配体)连接到某种固相载体上,并将载有配体的固相载体装柱,当待提纯的生物大分子通过此层析柱时,此生物大分子便与载体上的配体特异的结合而留在柱上,其他物质则被冲洗出去。然后再用适当方法使这种生物大分子从配体上分离并洗脱下来,从而达到分离提纯的目的(图3-10)。上海创赛科技提供9008-97-3,植物血球凝集素Phytohemagglutinin BR,商品编号:D23-RD1047-1g,价格560元。
亲和层析由于是配体与待分离物质进行特异性结合,所以分离提纯的效率极高,可提高纯度几千倍,是当前最为理想的提纯和浓缩方法。亲和层析的配体与待分离物质特异性结合性质还可用来从变性的样品中提取出其中未变性的部分,从大量污染的物质中提纯小量所需成分,亲和层析还可用来从极度稀薄的液体中浓缩其溶质。上海创赛科技提供葡聚糖凝胶G-50中颗粒,Sephadex G-50 medium,商品编号:B11000414-25g,价格504元。
亲和层析所用的载体和凝胶过滤所要求的凝胶特性相同,即化学性质稳定,不带电荷,吸附能力弱,网状疏松,机械强度好,不易变形,能保障流速的物质。聚丙烯酰胺凝胶颗粒、葡聚糖凝胶颗粒以及琼脂糖凝胶颗粒都可用,其中以琼脂糖凝胶(Sepharose4B)型应用最广泛。亲和层析的关键是设法选择合适的配体,并将此配体与载体以化学方法连接起来,形成稳定的共价键,这需要在实际工作中根据需要加以选择和试验。上海创赛科技提供61970-08-9,琼脂糖凝胶 CL-4B,BR ,商品编号:D16-1027316-100ml,价格460元。
上海创赛科技性能卓越,白介素细胞因子,胎牛血清,电泳设备科学仪器,原料药标准品,化学试剂,细胞培养耗材,上海创赛,海量产品特价促销中,欢迎来电咨询!