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何经理整理ELISA实验中常见的几个问题

教育装备采购网 2016-01-25 09:53 围观333次

  一些新手朋友在刚做ELISA实验的时候总有这样那样的问题存在,总结2015年以来何经理整理出了一些新手朋友最常见的几个问题:

  第一个问题:所有孔未显色?

  对于这个问题可能是一下原因导致的:

  1、微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。

  2、用错试剂。

  3、在操作中忘记加酶或抗体。

  相应的解决办法:

  1、检查洗板器械,比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。

  2、在加样前,要看清瓶签。

  3、严格按说明书操作步骤进行实验,确保每步都到位。

  第二个问题:所有孔显色偏低?

  以下的五个操作错误事项是致使所有孔显色偏低的因素:

  1、微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。

  2、洗板不干净。

  3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。

  4、温度没达到要求。

  5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。

  解决办法:

  1、手工加蒸馏水洗板时,要避免吸头接触微孔,常更换新的蒸馏水。

  2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水(约400ul),且至少洗板五次。

  3、严格按说明书要求操作,每次取样要更换吸头。

  4、控制孵育温度在25℃。

  5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足,加样时务必将吸头内液体打尽。

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