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解析PCR现在又扩增不出来了怎么办

教育装备采购网 2016-03-25 10:06 围观1476次

  PCR新手指南:PCR现在又扩增不出来了怎么办?

  这个问题是常见的问题,就是一个PCR实验一直都做得很好,停一段时间后再做就不行了。一通乱找原因后还是不行,很痛苦!

  找问题要从大到小:

  1、PCR扩增体系问题

  用其他正在进行的且扩增正常的模板和引物证明PCR扩增体系没有问题,即PCR反应混合物、水、取液器、PCR仪、操作等都是好的(阳性对照)

  2、引物问题

  用以前扩增产物做模板(稀释50倍),证明引物没有问题

  3、只是模板问题了。

  因为样本降解的可能性比引物降解的可能性高得多。也可能是样本中的抑制物过多(新鲜时没有溶出来)。

  不要靠运气找问题,先做第一条很重要。乱找问题常常让人失去信心的。

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