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基因表达的调控

基因表达的调控DNA储存着细胞和生物体的所有信息，但在不同组织、不同的发育阶段，这些细胞是有着很大差异的，这些差异源于某些基因的表达与否及表达量上的差异。基因表达的调控可在转录水平和翻...

2017-01-10 围观523次 [维修] 高教职教

基因表达和遗传密码

DNA能够自主复制、永久存在的性质决定了其作为遗传信息载体的使命，其分子上以核苷酸序列为存在形式的遗传信息还要通过基因表达才能体现。基因表达是指遗传信息通过转录和翻译生成具有特定生物学...

2017-01-09 围观637次 [维修] 高教职教

DNA复制的引物、酶类和蛋白质因子

1.RNA引物DNA聚合酶只能从3端延长已经存在的DNA或RNA链开始合成，而不能从头合成一条DNA链，因此，复制起始必须有一条RNA引物。通常RNA引物的长度是4～12个核苷酸，由引发酶催化合成。2.DNA聚合...

2017-01-06 围观1123次 [应用] 高教职教

DNA复制、损伤与修复

在细胞分裂过程中，亲代细胞所含的遗传信息完整地传递到两个子代细胞，其中的DNA在传代时完整地复制成两份，这个过程称为DNA复制。复制是严格按照A与T配对和G与C配对的规律进行的，通常有高度的...

2017-01-04 围观519次 [维修] 高教职教

分子生物学基本理论

分子生物学基本理论一、核酸是遗传物质核酸是遗传物质。核酸被分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。DNA是一种由四种单核苷酸组成的高分子单链化合物，并由两条单链严格按A与T配对和G与C配对的...

2017-01-03 围观975次 [原理] 高教职教

梯度离心技术

梯度离心是待分离的物质在具有密度梯度的介质中进行的离心。梯度离心可分为两种，即密度梯度离心(又称沉降速度离心、速度区带离心或差速区带离心)和平衡密度梯度离心(等密度梯度离心和沉降平衡离...

2017-01-03 围观987次 [原理] 高教职教

离心技术的应用

根据应用目的不同，离心机有分析用和制备用两种。分析用超速离心机仅能对小样品(小于1ml)进行分析(如分子量的测量);制备用离心机是为提取、纯化大分子组分设计的，可对10~2000ml的样品进行分离。...

2016-12-29 围观800次 [应用] 高教职教

离心技术的基本原理

基本原理物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为(弧度数/秒)时，可得：F=M2r或者F=VD2r上述表明：被离心物质所受到的离心力与该物...

2016-12-28 围观395次 [原理] 高教职教

创赛科技2017年元旦放假通知

创赛科技2017年元旦放假通知2017元旦将至，根据国家国务院法定节假日放假规定，结合公司情况，现做出如下放假安排：2016年12月31日（星晴六）至2017年1月2日（星期一）休假，共3天，2017年1月3日...

2016-12-27 围观1115次 [简讯] 高教职教

高效毛细管电泳类型及应用

(1)毛细管区带电泳毛细管区带电泳法(CapillaryZoneElectrophoresis，CZE)的分离是基于组分淌度的区别。一般毛细管内壁带负电荷，电渗流从阳极移动至阴极，流出顺序是阴离子中性分子阳离子。若毛...

2016-12-26 围观687次 [维修] 高教职教

高效毛细管电泳的基本原理

高效毛细管电泳(HighPerformanceCapillaryElectrophoresis，HPCE)和一般电泳法的区别在于使用毛细管柱。在熔融石英毛细管内壁覆盖一层硅氧基(Si-O)阴离子，由于吸引了溶液中的阳离子，由此在毛细...

2016-12-23 围观1476次 [原理] 高教职教

聚丙烯酰胺凝胶电泳

1、聚丙烯酰胺的合成和结构聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(Acrylamide简写为Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(N，N1-methylene-bisacrylamide，简写Bis)在催化剂的作用下，聚合交联成含有酰胺基侧链的脂...

2016-12-22 围观1868次 [维修] 高教职教

电泳技术的种类

电泳技术的种类很多。根据有无固体支持物，可分为两大类，即界面电泳和区带电泳。界面电泳是指在溶液中进行的电泳，没有固体支持物。当溶液中有几种带电粒子时，通电后，由于不同粒子泳动速度不...

2016-12-21 围观971次 [原理] 高教职教

电泳技术Techniques in Electrophoresis

一、基本概念目前电泳技术已被广泛应用于蛋白质、核酸和氨基酸等物质的分离和鉴定。何谓电泳?在溶液中，带电粒子在外加电场的作用下，向相反电极方向移动的现象，称为电泳。电泳时不同的带电粒子...

2016-12-20 围观571次 [维修] 高教职教

亲和层析原理(Affinity Chromatography)

亲和层析法是近年来广为重视并得到迅速发展的提纯、分离方法之一。许多物质都具有和某化合物发生特异性可逆结合的特性。例如：酶与辅酶或酶与底物(产物或竞争性抑制剂等)，抗原与抗体，凝集素与...

2016-12-19 围观1347次 [维修] 高教职教

凝胶过滤技术(Gel filtration technology)

凝胶过滤是利用具有一定口径范围的多孔凝胶的分子筛作用对生物大分子进行分离的层析技术。当样品随流动相经过由凝胶组成的固定相时，分子量大的物质不能扩散进入凝胶颗粒内部，于是随流动相流经...

2016-12-16 围观1056次 [维修] 高教职教

离子交换层析基本操作方法

离子交换层析(Ion-exchangeChromatography)离子交换层析是利用离子交换剂对需要分离的各种离子具有不同的亲和力(静电引力)而达到分离目的的层析技术。离子交换层析的固定相是离子交换剂，流动相...

2016-12-14 围观4474次 [维修] 高教职教

分配层析原理 Distribution Chromatography

分配层析是利用混合物中各组分在两相中分配系数不同而达到分离目的的层析技术，相当于一种连续性的溶剂抽提方法。在分配层析中，固定相是极性溶剂(例如水、稀硫酸、甲醇等)。此类溶剂能和多孔的...

2016-12-13 围观14882次 [原理] 高教职教

吸附层析技术的简介及原理

层析技术是近代生物化学实验中常用的分析方法。任何层析过程都是在两个相中进行的。一是固定于支持物上的固定相，另一是流经固定相的流动相，由于样品中各组分理化性质(如溶解度、吸附能力、分子...

2016-12-12 围观5390次 [原理] 高教职教

几种常用的国产分光光度计

(一)721型分光光度计(图2-5)这是一种采用光电管为受光器的较高级可见光分光光度计。由稳压电源供电的光源灯发出稳定的白光。如图2-5所示。光线经反射镜投入狭缝，再经准直镜反射进入棱镜，在棱镜...

2016-12-08 围观9576次 [维修] 高教职教

分光光度计的结构原理

不论光度计(Photometer)、比色计(Colorimeter)还是分光光度计(Spectrophotometer)，其基本结构原理都是相似的，都由光源、单色光器、狭缝、吸收杯和检测器系统等部分组成(图2-3)。(一)光源一个良...

2016-12-06 围观2104次 [原理] 高教职教

分光光度法Spectrophotometry基本原理

分光光度法Spectrophotometry基本原理光线是高速运动的光子流，也是具有波长和频率特征的电磁波。光子的能量与频率成正比，与波长成反比。肉眼可见的光线称为可见光。可见光只占电磁波谱的很窄部...

2016-12-05 围观904次 [原理] 高教职教

生物大分子制备原理

一、透析和超滤(DialysisandUltrafiltration)1、透析是利用蛋白质等生物大分子不能透过半透膜而进行纯化的一种方法。脱盐透析是应用最广泛的一种透析方法。将含盐的生物大分子溶液装入透析袋内,...

2016-12-01 围观790次 [原理] 高教职教

以蛋白质为例的分离纯化实验

盐析(Saltingout)盐析方法是蛋白质和酶提纯工作中应用最早，至今仍广泛应用的方法。其原理是蛋白质在高浓度的盐溶液中，随着盐浓度的逐渐增加，蛋白质表面的电荷被中和，水化膜被破坏，蛋白质分...

2016-11-30 围观565次 [维修] 高教职教

生物大分子的基本制备技术

生物大分子的基本制备技术生物大分子的制备过程包括选材、细胞破碎和细胞器分离、生物大分子提取纯化、以及样品浓缩干燥和储存等。生物大分子的制备是一项十分细致的工作，既要设法得到它们的纯...

2016-11-29 围观499次 [维修] 高教职教

核酸的鉴定、保存与应用

(一)核酸的鉴定1.浓度鉴定核酸浓度的定量鉴定可通过紫外分光光度法与荧光光度法进行。(1)紫外分光光度法：紫外分光光度法是基于核酸分子成分中的碱基均具有一定的紫外线吸收特性，最大吸收波长在...

2016-11-28 围观1332次 [维修] 高教

核酸分离与纯化的技术路线设计

(一)核酸的释放正常情况下，无论是DNA还是RNA均位于细胞内，因此核酸分离与纯化的第一步就是破碎细胞、释放核酸。细胞的破碎方法非常多，包括机械法与非机械法两大类。机械法又可分为液体剪切法...

2016-11-25 围观1093次 [维修] 高教职教

核酸分离与纯化的设计与原则

细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子，均与蛋白质结合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein，DNP)，RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein...

2016-11-24 围观516次 [原理] 高教职教

细胞因子的检测方法

细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中，细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免...

2016-11-23 围观599次 [应用] 高教职教

H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法实验步骤

一、操作方法1、培养液中按1%的体积加双抗(含青霉素1万U/ml，链霉素0.01g/ml)及肝素液(含肝素100U/ml)。用3.5%NaHCO3液调pH值为7.2~7.4，然后加灭活的小牛血清，使浓度为20%。再加PHA(50U~75U/m...

2016-11-22 围观1431次 [应用] 高教职教

细胞增殖检测：H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法

一、实验原理：T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体，在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA)、抗CD2和抗CD3McAb作为多克隆刺激剂...

2016-11-22 围观1052次 [应用] 高教职教

血清蛋白琼脂糖凝胶电泳原理

琼脂糖(agarose)是经过挑选，以质地较纯的琼脂(agar)作为原料而制成的。琼脂在化学上是由琼脂糖和琼脂胶组成的复合物。琼脂胶是一含有硫酸根和羟基的多糖，它具有离子交换性质，这种性质会给电泳...

2016-11-18 围观784次 [原理] 高教职教

血清蛋白琼脂糖凝胶电泳实验操作方法

【试剂】1、苏丹黑染色液将苏丹黑B加到无水乙醇中至饱和，摇荡使乙酰化。用前过滤。上海创赛科技提供4197-25-5，苏丹黑B，GR，商品编号：D16-1032969-100G，价格431元。2、巴比妥缓冲液称取巴比...

2016-11-18 围观920次 [应用] 高教职教

多因素值得注意如何让你的qPCR更完美

RNA抽提关于RNA抽提,各个学术团体和科研机极使用不同的操作流程，但下列因素是值得注意的事情：1、不同方式保存的及不同形态的样品的RNA提叏方法有所差别;2、分离总RNA，或是大小片殌RNA时提叏方...

2016-11-17 围观604次 [应用] 高教职教

规范操作避免PCR反应污染方法

PCR反应常见的污染表现为：标本间交叉污染，PCR试剂污染、PCR扩增产物污染以及实验中兊隆质粒的污染。为了有效地避克这些污染，使得实验的结果更准确、更直观:1.合理分隔实验室将样品的处理、配...

2016-11-16 围观701次 [应用] 高教职教

实时荧光定量PCR技术

实时荧光定量PCR技术(Real-timeqPCR)是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过特定数学原理对未知模板进行定量分枂的方法。因其定量准确、特异性强、操...

2016-11-11 围观963次 [方案] 高教职教

ES细胞的冻存方法

操作方法1.常规方法将细胞消化成单细胞悬液;2.转入试管，1000转/分钟离心5分钟;3.配适量冻存液(为含10%二甲亚砜(DMSO)，10%FBS的DMEM培养液);上海创赛科技提供67-68-5，二甲亚砜，DimethylSulfo...

2016-11-09 围观489次 [维修] 高教职教

ES细胞的复苏方法

1.提前制备好相应数量的Feeder;2.准备37-39℃的热水，从液氮罐中取出所需冻存管(冻存细胞)，迅速投入热水中，迅速剧烈摇动直至冻存液全部融化;上海创赛科技提供细胞冻存管，FreezingTubes，商品...

2016-11-08 围观597次 [维修] 高教职教

ES细胞的传代操作方法

步骤：1.前一天下午做好所需数量的Feeder细胞板;2.提前半小时左右将培养基从4℃冰箱取出，放于室温(或者放于37℃温箱内);3.将ES细胞培养皿、Feeder细胞培养皿从培养箱内取出(相差显微镜下作常规...

2016-11-04 围观1283次 [维修] 高教职教

饲养层细胞（Feeder）的制备

饲养层细胞(Feeder)的制备注：含10ug/ml丝裂霉素C的DMEM血清培养基(FBS占10%)(实验室所用MMC为10mg/mL，Calbiochem)1.弃去细胞培养皿中的培养液，加入适量含10ug/ml丝裂霉素C的培养基(DMEM+10%F...

2016-11-03 围观3158次 [维修] 高教职教

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