紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。紫外分光光度计可以在紫外可见光区意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些定波长的光能量，相应地发生了分子振动能跃迁和电子能跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些征波长处的吸光度的低判别或测定该物质的含量。
作原理
物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些定波长的光能量，相应地发生了分子振动能跃迁和电子能跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。因此，每种物质就有其有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些征波长处的吸光度的低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
又因为许多物质在紫外-可见光区有征吸收峰，所以可用紫外分光光度法对这些物质分别行测定(定量分析和定性分析)。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。
朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律，俗称光吸收定律，是分光光度法定量分析的依据和基础。当入射光波长定时，溶液的吸光度A是吸光物质的浓度C及吸收介质厚度l(吸收光程)的函数。
分光光度法
确定实验条件，并在此条件下测得标准物质的吸收峰以及其对应波长值;再在选定的波长范围内(，分别以(不同浓度)标准溶液的吸光度和溶液浓度为横、纵坐标绘出化合物溶液的标准曲线得到其所对应的数学方程;接着在相同实验条件下配制待测溶液，测得待测溶液的吸光度，用已获得的标准曲线方程求出待测溶液中所需测定的化合物的含量
使用范围
凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物，根据在定吸收波长处所测得的吸收度，可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。
波长范围
可见-紫外分光光度计。其应用波长范围为200～400nm的紫外光区、400～850nm的可见光区。主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等件组成。
应用
1 检定物质
根据吸收光谱图上的些征吸收，别是大吸收波长虽ax和摩尔吸收系数是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在内外的药典中，已将众多的药物紫外吸收光谱的大吸收波长和吸收系数载入其中，为药物分析提供了很好的手段。
2 与标准物及标准图谱对照
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同溶剂中，在同条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同物质，则两者的光谱图应致。如果没有标样，也可以和现成的标 准谱图对照行。这种方法要求仪器准确，密度，且测定条件要相同。
3 大吸收波长吸收系数的致性
4 纯度检验
5 推测化合物的分子结构
6 氢键强度的测定
实验证明，不同的性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不 同溶剂中氢键强度，以确定选择哪种溶剂 。
7 络合物组成及稳定常数的测定
8 反应动力学研究
9 在有机分析中的应用
有机分析是门研究有机化合物的分离、鉴别及组成结构测定的科学，它是在有机化学和分析化学的基础上发展起来的综合性学科。
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