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第 9 / 12 页
亲和层析原理(Affinity Chromatography)
亲和层析法是近年来广为重视并得到迅速发展的提纯、分离方法之一。许多物质都具有和某化合物发生特异性可逆结合的特性。例如:酶与辅酶或酶与底物(产物或竞争性抑制剂等),抗原与抗体,凝集素与...
2016-12-19
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凝胶过滤技术(Gel filtration technology)
凝胶过滤是利用具有一定口径范围的多孔凝胶的分子筛作用对生物大分子进行分离的层析技术。当样品随流动相经过由凝胶组成的固定相时,分子量大的物质不能扩散进入凝胶颗粒内部,于是随流动相流经...
2016-12-16
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离子交换层析基本操作方法
离子交换层析(Ion-exchangeChromatography)离子交换层析是利用离子交换剂对需要分离的各种离子具有不同的亲和力(静电引力)而达到分离目的的层析技术。离子交换层析的固定相是离子交换剂,流动相...
2016-12-14
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分配层析原理 Distribution Chromatography
分配层析是利用混合物中各组分在两相中分配系数不同而达到分离目的的层析技术,相当于一种连续性的溶剂抽提方法。在分配层析中,固定相是极性溶剂(例如水、稀硫酸、甲醇等)。此类溶剂能和多孔的...
2016-12-13
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吸附层析技术的简介及原理
层析技术是近代生物化学实验中常用的分析方法。任何层析过程都是在两个相中进行的。一是固定于支持物上的固定相,另一是流经固定相的流动相,由于样品中各组分理化性质(如溶解度、吸附能力、分子...
2016-12-12
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[原理]
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几种常用的国产分光光度计
(一)721型分光光度计(图2-5)这是一种采用光电管为受光器的较高级可见光分光光度计。由稳压电源供电的光源灯发出稳定的白光。如图2-5所示。光线经反射镜投入狭缝,再经准直镜反射进入棱镜,在棱镜...
2016-12-08
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分光光度计的结构原理
不论光度计(Photometer)、比色计(Colorimeter)还是分光光度计(Spectrophotometer),其基本结构原理都是相似的,都由光源、单色光器、狭缝、吸收杯和检测器系统等部分组成(图2-3)。(一)光源一个良...
2016-12-06
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分光光度法Spectrophotometry基本原理
分光光度法Spectrophotometry基本原理光线是高速运动的光子流,也是具有波长和频率特征的电磁波。光子的能量与频率成正比,与波长成反比。肉眼可见的光线称为可见光。可见光只占电磁波谱的很窄部...
2016-12-05
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[原理]
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生物大分子制备原理
一、透析和超滤(DialysisandUltrafiltration)1、透析是利用蛋白质等生物大分子不能透过半透膜而进行纯化的一种方法。脱盐透析是应用最广泛的一种透析方法。将含盐的生物大分子溶液装入透析袋内,...
2016-12-01
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以蛋白质为例的分离纯化实验
盐析(Saltingout)盐析方法是蛋白质和酶提纯工作中应用最早,至今仍广泛应用的方法。其原理是蛋白质在高浓度的盐溶液中,随着盐浓度的逐渐增加,蛋白质表面的电荷被中和,水化膜被破坏,蛋白质分...
2016-11-30
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生物大分子的基本制备技术
生物大分子的基本制备技术生物大分子的制备过程包括选材、细胞破碎和细胞器分离、生物大分子提取纯化、以及样品浓缩干燥和储存等。生物大分子的制备是一项十分细致的工作,既要设法得到它们的纯...
2016-11-29
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核酸的鉴定、保存与应用
(一)核酸的鉴定1.浓度鉴定核酸浓度的定量鉴定可通过紫外分光光度法与荧光光度法进行。(1)紫外分光光度法:紫外分光光度法是基于核酸分子成分中的碱基均具有一定的紫外线吸收特性,最大吸收波长在...
2016-11-28
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核酸分离与纯化的技术路线设计
(一)核酸的释放正常情况下,无论是DNA还是RNA均位于细胞内,因此核酸分离与纯化的第一步就是破碎细胞、释放核酸。细胞的破碎方法非常多,包括机械法与非机械法两大类。机械法又可分为液体剪切法...
2016-11-25
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核酸分离与纯化的设计与原则
细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子,均与蛋白质结合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein...
2016-11-24
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细胞因子的检测方法
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免...
2016-11-23
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H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法实验步骤
一、操作方法1、培养液中按1%的体积加双抗(含青霉素1万U/ml,链霉素0.01g/ml)及肝素液(含肝素100U/ml)。用3.5%NaHCO3液调pH值为7.2~7.4,然后加灭活的小牛血清,使浓度为20%。再加PHA(50U~75U/m...
2016-11-22
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[应用]
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职教
细胞增殖检测:H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法
一、实验原理:T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA)、抗CD2和抗CD3McAb作为多克隆刺激剂...
2016-11-22
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[应用]
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血清蛋白琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖(agarose)是经过挑选,以质地较纯的琼脂(agar)作为原料而制成的。琼脂在化学上是由琼脂糖和琼脂胶组成的复合物。琼脂胶是一含有硫酸根和羟基的多糖,它具有离子交换性质,这种性质会给电泳...
2016-11-18
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[原理]
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血清蛋白琼脂糖凝胶电泳实验操作方法
【试剂】1、苏丹黑染色液将苏丹黑B加到无水乙醇中至饱和,摇荡使乙酰化。用前过滤。上海创赛科技提供4197-25-5,苏丹黑B,GR,商品编号:D16-1032969-100G,价格431元。2、巴比妥缓冲液称取巴比...
2016-11-18
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[应用]
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蓝光切胶仪的作用与产品规格
蓝光切胶仪采用LED蓝光激发,取代传统紫外透射仪,用于凝胶电泳实验的观测、切胶,极大保护了实验人员的眼睛、脸、手等易暴露部位,不再遭受紫外线的伤害。同时蓝光对核酸片段无损伤,避免因紫外...
2016-11-17
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[导购]
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多因素值得注意 如何让你的qPCR更完美
RNA抽提关于RNA抽提,各个学术团体和科研机极使用不同的操作流程,但下列因素是值得注意的事情:1、不同方式保存的及不同形态的样品的RNA提叏方法有所差别;2、分离总RNA,或是大小片殌RNA时提叏方...
2016-11-17
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[应用]
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职教
规范操作 避免PCR反应污染方法
PCR反应常见的污染表现为:标本间交叉污染,PCR试剂污染、PCR扩增产物污染以及实验中兊隆质粒的污染。为了有效地避克这些污染,使得实验的结果更准确、更直观:1.合理分隔实验室将样品的处理、配...
2016-11-16
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[应用]
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职教
实时荧光定量PCR技术
实时荧光定量PCR技术(Real-timeqPCR)是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过特定数学原理对未知模板进行定量分枂的方法。因其定量准确、特异性强、操...
2016-11-11
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[方案]
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ES细胞的冻存方法
操作方法1.常规方法将细胞消化成单细胞悬液;2.转入试管,1000转/分钟离心5分钟;3.配适量冻存液(为含10%二甲亚砜(DMSO),10%FBS的DMEM培养液);上海创赛科技提供67-68-5,二甲亚砜,DimethylSulfo...
2016-11-09
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职教
ES细胞的复苏方法
1.提前制备好相应数量的Feeder;2.准备37-39℃的热水,从液氮罐中取出所需冻存管(冻存细胞),迅速投入热水中,迅速剧烈摇动直至冻存液全部融化;上海创赛科技提供细胞冻存管,FreezingTubes,商品...
2016-11-08
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[维修]
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职教
ES细胞的传代操作方法
步骤:1.前一天下午做好所需数量的Feeder细胞板;2.提前半小时左右将培养基从4℃冰箱取出,放于室温(或者放于37℃温箱内);3.将ES细胞培养皿、Feeder细胞培养皿从培养箱内取出(相差显微镜下作常规...
2016-11-04
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职教
DMEM培养基配置方法
一、配制DMEM血清培养基1.提前一天将分装好的FBS从20℃冰箱取出,放于4℃冰箱化冻;2.在细胞间中将FBS以及其它需要添加的成分(如,丙酮酸钠、抗生素等),按照比例加入DMEM培养基中,作好标签;...
2016-11-01
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11098
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[维修]
高教
职教
如何查找连续的mRNA、cDNA、蛋白序列
如何查找连续的mRNA、cDNA、蛋白序列(以人类的IL6为例)1、进入NCBI主页:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/在search后面选择Gene,在for后面填写需要查找的基因的名字。如图所示:点击Go,出现以下界...
2016-10-28
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[维修]
高教
职教
利用Map viewer查找基因序列、mRNA序列
利用Mapviewer查找基因序列、mRNA序列、启动子(Promoter)NCBI(NationalCenterforBiotechnologyInformation)是指美国国立生物技术信息中心。理解自然无声但精妙的关于生命细胞的语言是现代分子生...
2016-10-27
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1312
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[维修]
高教
职教
细胞凋亡检测方法 Caspase-3活性的检测
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶...
2016-09-28
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630
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[应用]
高教
职教
DNA片断化检测
细胞凋亡时主要的生化特征是其染色质发生浓缩,染色质DNA在核小体单位之间的连接处断裂,形成50~300kbp长的DNA大片段,或180~200bp整数倍的寡核苷酸片段,在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱(DNAladder...
2016-09-23
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[维修]
高教
职教
国家粮食质量监测中心仪器设备配置目录
国家粮食质量监测中心仪器设备配置目录序号拟配仪器设备用途1气相色谱仪粮食中微量农药残留、油脂中溶剂残留的检测与确证2气-质联机3气相色谱串联质谱仪(GC-MS-MS)4原子吸收分光光度计粮油中各...
2016-09-20
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[配备目录]
高教
国家粮食质量监测站仪器设备配置目录
国家粮食质量监测站仪器设备配置目录序号拟配仪器设备用途1气相色谱仪粮食中微量农药残留、油脂中溶剂残留的检测与确证2液相色谱仪粮油食品中各种添加剂如色素、生物毒素等的检测与确证3原子吸收...
2016-09-20
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6047
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[配备目录]
高教
粮食质量检验机构仪器设备配置目录
粮食质量检验机构仪器设备配置目录序号拟配仪器设备用途1气相色谱仪粮食中微量农药残留、油脂中溶剂残留的检测与确证2液相色谱仪粮油食品中各种添加剂如色素、生物毒素等的检测与确证3原子吸收分...
2016-09-20
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[配备目录]
高教
粮油加工企业仪器设备配置参考表
粮油加工企业仪器设备配置参考表号拟配仪器设备用途1气相色谱仪粮食中微量农药残留、油脂中溶剂残留的检测与确证2液相色谱仪粮油食品中各种添加剂如色素、生物毒素等的检测与确证3气-质联机粮食...
2016-09-20
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[配备目录]
高教
北京市第十八中学生物实验室解决方案
不断进行的新课改赋予教育全新的意义,对生物实验室教学也提出了更高的要求,动手能力强,探究思维敏锐的学生将越来越受到未来社会的青睐。9月8日,丰台区高中生物教师实验技能培训活动在北京市...
2016-09-20
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[案例]
基教
实验缓冲溶液的配置方法
(1)5TBE(tris-硼酸及EDTA)缓冲液的配制(1000ml):材料:Tris54g,硼酸27.5g,0.5mol/LEDTA20ml方法:将pH调到8.0,定容至1000ml,4℃冰箱保存,用时稀释10倍。(2)加样缓冲液的配制:0.25%溴酚蓝...
2016-09-18
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[维修]
高教
职教
DNA琼脂糖凝胶电泳实验原理和方法步骤
一、实验目的学习和掌握琼脂糖电泳法鉴定DNA的原理和方法。二、实验原理琼脂糖凝胶电泳是用于分离、鉴定和提纯DNA片段的标准方法。琼脂糖是从琼脂中提取的一种多糖,具亲水性,但不带电荷,是一...
2016-09-14
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1899
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[原理]
高教
职教
RT-PCR与qPCR所需要的引物区别
原理不同:荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中荧光染色剂来看是否有目的片段。应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通PCR可以...
2016-09-09
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[原理]
高教
职教
天凉好个秋 9月开学专属实验品大促
天凉好个秋,9月开学大促再接力!活动一开学有礼1!为响应各位顾客的真诚号召,热力活动下单享3倍积分持续发热!九月开学季再来接力30天!至2016年9月30日之前,在创赛中国产品商城下单即享3倍积...
2016-09-06
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