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中药中多种农药残留量的测定——GC/MS法解决方案

中药材种植过程中使用的农药种类多达几百种，包括有机磷、有机氯、拟除虫菊酯等多种类型。中药农药残留已成为中药走向国际市场的瓶颈，严重滞后了我国中药材现代化、国际化的步伐。《中国药典》...

2017-03-13 围观1495次 [方案] 高教

Nature新发现骨骼能分泌激素调控胖瘦

哥伦比亚大学医学中心的研究人员进行了一项小鼠研究，结果表明骨细胞分泌的一种激素可以抑制食欲。这一发现增添了已知的骨分泌激素种类，并且揭示了一种此前未知的食欲调节机制，并为肥胖，2型糖...

2017-03-13 围观405次 [前沿] 高教职教

琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术

[目的要求]通过本实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术[实验原理]琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于...

2017-03-10 围观2173次 [维修] 高教职教

干扰RNA筛选发现乳腺癌抵抗药物治疗的关键

近日，美国范德堡大学的研究人员在国际学术期刊CancerResearch上发表了一项最新研究进展，他们为了发现雌激素受体阳性乳腺癌细胞抵抗CDK4/6抑制剂的机制，使用全激酶组siRNA筛选来发现发生下调以...

2017-03-10 围观512次 [前沿] 高教职教

DNA探针的标记基本原理及解决方案

【基本原理】核酸(DNA或RNA)分子探针是指能与互补核酸序列退火杂交，并可被特殊的方法探知的已知序列核酸片段。根据核酸探针标记物的性质及探针的检测方法不同，核酸探针可分为：放射性标记探针...

2017-03-07 围观2542次 [方案] 高教职教

DNA体外连接的基本原理及方案

【基本原理】利用DNA连接酶把目的DNA片段和载体DNA连接在一起，成为一个新的重组分子。目的DNA片段被限制酶消化后其末端只可能有3种形式：(1)带有相同的粘性末端：用同一种酶或同尾酶处理可得这...

2017-03-03 围观1755次 [方案] 高教职教

Southern blot(印迹)技术的基本原理及方案

【基本原理】Southernblot是将电泳分离的DNA片段转移到一定的固相支持物上的过程。DNA分子用限制性内切酶酶切后，经琼脂糖凝胶电泳将所得的DNA片段按分子量大小分离，然后将含DNA片段的琼脂糖凝...

2017-03-01 围观2066次 [方案] 高教职教

感受态细菌的制备（化学法）

【基本原理】重组DNA分子需导入合适的宿主细胞(真核或原核细胞)才能进行复制，增殖和表达。用于分子克隆技术中的受体细胞为大肠杆菌K-12的衍生菌(DH5等)。细菌处于易于吸收外源DNA的状态叫感受态...

2017-02-27 围观844次 [方案] 高教职教

琼脂糖凝胶电泳

【基本原理】琼脂糖凝胶电泳是分离、纯化、鉴定DNA片段的常用方法，具有简便、快速的优点。DNA琼脂糖凝胶电泳的原理与蛋白质的电泳原理基本相同，DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电荷，在电场...

2017-02-23 围观686次 [方案] 高教职教

DNA 与RNA 含量测定

【基本原理】核酸分子中含有碱基使核酸在260nm下有最大吸收。紫外吸收是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的性质，含有嘌呤和嘧啶的物质，不论是核苷、核苷酸或核酸都有吸收紫外光的特性。蛋白...

2017-02-22 围观785次 [方案] 高教职教

人外周血白细胞DNA的制备

【基本原理】从全血中制备白细胞DNA，可用水直接破裂血中红细胞和白细胞的细胞膜及核膜，释出血红蛋白、细胞核;再用KI裂解细胞核并溶解DNA;最后用酚/氯仿除去蛋白质，加无水乙醇使DNA沉淀，经A2...

2017-02-21 围观694次 [维修] 高教职教

组织中基因组DNA 的制备

【基本原理】真核生物的DNA主要存在于细胞核内，以双链线性高分子形式存在。DNA提取的主要过程是：破碎组织和细胞，去除与核酸结合的蛋白质及其它多糖、脂类等生物大分子，本实验通过蛋白酶K和S...

2017-02-20 围观539次 [维修] 高教职教

蛋白质印迹免疫分析操作步骤

(一)转移印迹1.转移前准备：将滤纸，硝酸纤维素膜(NC)剪成与胶同样大小，NC膜浸入蒸馏水中10-20min后浸入转移buffer中平衡30min。2.凝胶平衡：将电泳后的SDS-PAGE胶板置于转移buffer中平衡30-60...

2017-02-10 围观923次 [维修] 高教职教

蛋白质印迹免疫分析（Western Blot Anglysis）

【基本原理】蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后，在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上，经封闭后再用抗待检蛋白质的抗体作为探针与之结合，经洗涤后，再将...

2017-02-09 围观609次 [方案] 高教职教

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）操作步骤

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)操作步骤1.按图安装玻璃板2.按表制备分离胶(10%)，将分离胶混匀后立即灌注于玻板间隙中，上层小心覆盖一层乙醇，将胶板垂直放于室温下，待分离胶聚合完全后，倾去上...

2017-02-08 围观3425次 [维修] 高教职教

SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）

【基本原理】一个混合蛋白质样品经过聚丙烯酰胺凝胶电泳以后，各组分由于电泳迁移率不同而被分离。这种差异就蛋白质分子本身而言主要与分子量以及所带净电荷和形状有关。当电泳体系中含有一定浓...

2017-02-07 围观1076次 [方案] 高教职教

蛋白质比色定量法

【基本原理】游离状态的考马斯亮蓝G250在酸性溶液中呈红褐色，与蛋白质结合后呈蓝色，蛋白质含量与颜色的深浅成正比，经595nm测定，可作出蛋白质含量与吸光度值的标准曲线，并求出未知样品的蛋白...

2017-02-06 围观576次 [维修] 高教职教

血清γ-球蛋白的提取与纯化

【基本原理】在蛋白质溶液中加入中性盐至一定浓度时,蛋白质会沉淀析出，这种作用称为盐析，其机制与下列因素有关：蛋白质分子表面水化层被破坏;蛋白质分子所带电荷被中和。盐析沉淀的蛋白质，其...

2017-02-04 围观1353次 [原理] 高教职教

化妆品中亚苄基樟脑磺酸检测方法

化妆品中亚苄基樟脑磺酸检测方法1、适用范围本方法介绍了采用高效液相色谱-紫外法测定化妆品中亚苄基樟脑磺酸(perfemikerC13-58079)的方法。暂无实验数据表明本方式适用于粉类、蜡质类化妆品。2...

2017-01-13 围观740次 [维修] 高教职教

重组DNA技术（分子克隆）技术方案

DNA又称基因工程(GeneticEngineering)。这项技术是在体外按照一定的目的和方案对DNA分子进行人工操作，将同一来源或异源的基因进行重组，然后把它们引入适当受体细胞中，随着该细胞的繁殖，DNA重...

2017-01-11 围观2012次 [技术] 高教职教

基因表达的调控

基因表达的调控DNA储存着细胞和生物体的所有信息，但在不同组织、不同的发育阶段，这些细胞是有着很大差异的，这些差异源于某些基因的表达与否及表达量上的差异。基因表达的调控可在转录水平和翻...

2017-01-10 围观523次 [维修] 高教职教

基因表达和遗传密码

DNA能够自主复制、永久存在的性质决定了其作为遗传信息载体的使命，其分子上以核苷酸序列为存在形式的遗传信息还要通过基因表达才能体现。基因表达是指遗传信息通过转录和翻译生成具有特定生物学...

2017-01-09 围观637次 [维修] 高教职教

DNA复制的引物、酶类和蛋白质因子

1.RNA引物DNA聚合酶只能从3端延长已经存在的DNA或RNA链开始合成，而不能从头合成一条DNA链，因此，复制起始必须有一条RNA引物。通常RNA引物的长度是4～12个核苷酸，由引发酶催化合成。2.DNA聚合...

2017-01-06 围观1123次 [应用] 高教职教

DNA复制、损伤与修复

在细胞分裂过程中，亲代细胞所含的遗传信息完整地传递到两个子代细胞，其中的DNA在传代时完整地复制成两份，这个过程称为DNA复制。复制是严格按照A与T配对和G与C配对的规律进行的，通常有高度的...

2017-01-04 围观518次 [维修] 高教职教

分子生物学基本理论

分子生物学基本理论一、核酸是遗传物质核酸是遗传物质。核酸被分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。DNA是一种由四种单核苷酸组成的高分子单链化合物，并由两条单链严格按A与T配对和G与C配对的...

2017-01-03 围观975次 [原理] 高教职教

梯度离心技术

梯度离心是待分离的物质在具有密度梯度的介质中进行的离心。梯度离心可分为两种，即密度梯度离心(又称沉降速度离心、速度区带离心或差速区带离心)和平衡密度梯度离心(等密度梯度离心和沉降平衡离...

2017-01-03 围观966次 [原理] 高教职教

离心技术的应用

根据应用目的不同，离心机有分析用和制备用两种。分析用超速离心机仅能对小样品(小于1ml)进行分析(如分子量的测量);制备用离心机是为提取、纯化大分子组分设计的，可对10~2000ml的样品进行分离。...

2016-12-29 围观800次 [应用] 高教职教

离心技术的基本原理

基本原理物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为(弧度数/秒)时，可得：F=M2r或者F=VD2r上述表明：被离心物质所受到的离心力与该物...

2016-12-28 围观393次 [原理] 高教职教

高效毛细管电泳类型及应用

(1)毛细管区带电泳毛细管区带电泳法(CapillaryZoneElectrophoresis，CZE)的分离是基于组分淌度的区别。一般毛细管内壁带负电荷，电渗流从阳极移动至阴极，流出顺序是阴离子中性分子阳离子。若毛...

2016-12-26 围观685次 [维修] 高教职教

高效毛细管电泳的基本原理

高效毛细管电泳(HighPerformanceCapillaryElectrophoresis，HPCE)和一般电泳法的区别在于使用毛细管柱。在熔融石英毛细管内壁覆盖一层硅氧基(Si-O)阴离子，由于吸引了溶液中的阳离子，由此在毛细...

2016-12-23 围观1475次 [原理] 高教职教

聚丙烯酰胺凝胶电泳

1、聚丙烯酰胺的合成和结构聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(Acrylamide简写为Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(N，N1-methylene-bisacrylamide，简写Bis)在催化剂的作用下，聚合交联成含有酰胺基侧链的脂...

2016-12-22 围观1867次 [维修] 高教职教

电泳技术的种类

电泳技术的种类很多。根据有无固体支持物，可分为两大类，即界面电泳和区带电泳。界面电泳是指在溶液中进行的电泳，没有固体支持物。当溶液中有几种带电粒子时，通电后，由于不同粒子泳动速度不...

2016-12-21 围观969次 [原理] 高教职教

电泳技术Techniques in Electrophoresis

一、基本概念目前电泳技术已被广泛应用于蛋白质、核酸和氨基酸等物质的分离和鉴定。何谓电泳?在溶液中，带电粒子在外加电场的作用下，向相反电极方向移动的现象，称为电泳。电泳时不同的带电粒子...

2016-12-20 围观569次 [维修] 高教职教

亲和层析原理(Affinity Chromatography)

亲和层析法是近年来广为重视并得到迅速发展的提纯、分离方法之一。许多物质都具有和某化合物发生特异性可逆结合的特性。例如：酶与辅酶或酶与底物(产物或竞争性抑制剂等)，抗原与抗体，凝集素与...

2016-12-19 围观1347次 [维修] 高教职教

凝胶过滤技术(Gel filtration technology)

凝胶过滤是利用具有一定口径范围的多孔凝胶的分子筛作用对生物大分子进行分离的层析技术。当样品随流动相经过由凝胶组成的固定相时，分子量大的物质不能扩散进入凝胶颗粒内部，于是随流动相流经...

2016-12-16 围观1056次 [维修] 高教职教

离子交换层析基本操作方法

离子交换层析(Ion-exchangeChromatography)离子交换层析是利用离子交换剂对需要分离的各种离子具有不同的亲和力(静电引力)而达到分离目的的层析技术。离子交换层析的固定相是离子交换剂，流动相...

2016-12-14 围观4468次 [维修] 高教职教

分配层析原理 Distribution Chromatography

分配层析是利用混合物中各组分在两相中分配系数不同而达到分离目的的层析技术，相当于一种连续性的溶剂抽提方法。在分配层析中，固定相是极性溶剂(例如水、稀硫酸、甲醇等)。此类溶剂能和多孔的...

2016-12-13 围观14871次 [原理] 高教职教

吸附层析技术的简介及原理

层析技术是近代生物化学实验中常用的分析方法。任何层析过程都是在两个相中进行的。一是固定于支持物上的固定相，另一是流经固定相的流动相，由于样品中各组分理化性质(如溶解度、吸附能力、分子...

2016-12-12 围观5380次 [原理] 高教职教

几种常用的国产分光光度计

(一)721型分光光度计(图2-5)这是一种采用光电管为受光器的较高级可见光分光光度计。由稳压电源供电的光源灯发出稳定的白光。如图2-5所示。光线经反射镜投入狭缝，再经准直镜反射进入棱镜，在棱镜...

2016-12-08 围观9570次 [维修] 高教职教

分光光度计的结构原理

不论光度计(Photometer)、比色计(Colorimeter)还是分光光度计(Spectrophotometer)，其基本结构原理都是相似的，都由光源、单色光器、狭缝、吸收杯和检测器系统等部分组成(图2-3)。(一)光源一个良...

2016-12-06 围观2102次 [原理] 高教职教

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